Toxicidad aguda tópica e irritabilidad dérmica de la decocción de hojas de Piper auritum Kunth (caisimón de anís)

ARTÍCULO ORIGINAL

 

Toxicidad aguda tópica e irritabilidad dérmica de la decocción de hojas de Piper auritum Kunth (caisimón de anís)

 

Acute topical toxicity and dermal irritability of decoction of Piper auritum Kunth (caisimón de anís)

 

 

Lic. Marisol López Barreiro, MSc. Ana Ibis García Hernández, MSc. Elisa Boucourt Rodríguez, Lic. Zulema Morejón Rodríguez

Laboratorio Central de Farmacología. "Dr. C. Francisco J. Morón Rodríguez", Facultad de Ciencias Médicas "Dr. Salvador Allende". La Habana, Cuba.

 

 

RESUMEN

Introducción: el Piper auritum Kunth comúnmente conocido como caisimón de anís, o anisón en algunas regiones del país, es una planta ampliamente utilizada como antiinflamatorio tópico. Tanto la hoja calentada como la decocción aplicada sobre la zona dañada son empleadas por la población con este fin.
Objetivo: determinar la toxicidad aguda tópica y la irritabilidad dérmica primaria de la decocción al 50 % de hojas frescas de Piper auritum.
Métodos: se emplearon hojas frescas colectadas el mismo día del ensayo y se utilizaron las técnicas descritas en las guías de la Organización para la Cooperación Económica y el Desarrollo (OECD), la 434 para la toxicidad dérmica utilizando ratas Wistar, manteniendo la decocción por 24 horas en contacto con la piel previamente afeitada; el peso de los animales fue controlado antes, durante y al concluir el experimento. Y la OECD 404 para la irritabilidad tópica empleando conejos Nueva Zelanda aplicando el extracto por 4 horas a la zona rasurada.
Resultados: no se apreciaron signos ni síntomas de toxicidad por la absorción dérmica en las ratas ni se observó evidencia de edema ni eritema en los conejos empleados.
Conclusiones: la decocción al 50 % de Piper auritum Kunth posee un índice de irritabilidad y una toxicidad dérmica bajas en nuestras condiciones de ensayo.

Palabras clave: Piper auritum, toxicidad aguda dérmica, irritación dérmica, plantas medicinales.

ABSTRACT

Introduction: Piper auritum Kunth, commonly known as caisimón de anís or anisón in some regions of the country, is a plant widely used as topical anti-inflammatory. To this end, leaves may be warmed up and applied to the damaged area or a decoction prepared and drunk. Objective: determine the acute topical toxicity and primary dermal irritability of a 50 % decoction of Piper auritum fresh leaves.
Methods: fresh leaves collected on the same day of the assay were used to prepare a decoction, following the techniques described in Guideline 434 of the Organization for Economic Co-operation and Development (OECD 434) about dermal toxicity in Wistar rats. Decoction was kept in contact with previously shaved skin for 24 hours. The weight of animals was controlled before, during and upon completion of the experiment. OECD Guideline 404 was used for topical irritability in New Zealand rabbits, applying the extract to a previously shaved area for 4 hours.
Results: no sign or symptom of toxicity due to dermal absorption was observed in the rats. Rabbits did not show any evidence of edema or erythema.
Conclusions: Piper auritum Kunth 50 % decoction has a low irritability and dermal toxicity rate in our test conditions.

Key words: Piper auritum, acute dermal toxicity, dermal irritation, medicinal plants.

 

INTRODUCCIÓN

Piper auritum Kunt es una planta originaria de México y muy propagada en Cuba. Se le encuentra con frecuencia en patios y jardines en lugares sombreados y húmedos.1 Es conocida popularmente en nuestro país como caisimón de anís en occidente y anisón en las regiones orientales, y ampliamente utilizada por nuestra población para el alivio de dolores articulares, inflamaciones y gases estomacales.

Esta planta perteneciente a la familia Piparaceae ha sido objeto de muchos estudios tanto de su composición química como de la amplia gama de usos que posee. La mayoría de estos estudios están dirigidos a su aceite esencial del que se sabe que el componente mayoritario es el safrol (71,8 %),2 y para el que se han descritos muchos usos como por ejemplo: antioxidante,2 antiplaguicida,3,4 antileishmaniasis,5 efecto espasmolítico,6 antidermatofítico.7 Se reporta además el efecto antiinflamatorio oral del extracto fluido,8 y aparece un estudio con diferentes métodos de extracción y diferentes solventes (acuoso y etanólico) en el que se reporta actividad antioxidante.9

Dentro de la batería de ensayos de primera barrera se encuentran los estudios de toxicidad a dosis única imprescindibles en la estimación del potencial tóxico de una sustancia, referido como el estudio cuali-cuantitativo de los fenómenos tóxicos y de su aparición en función del tiempo tras la administración de una dosis única de la sustancia o de varias dosis fraccionadas en el transcurso de 24 horas.10

En la búsqueda realizada en la base de datos en Scielo, Pubmed, Lilacs son escasos los reportes de estudios de esta planta y aparecen con otras formulaciones,2-9 no encontramos estudios con extractos acuosos del caisimón a pesar de ser la forma más frecuente en que la usa la población por ser la que está a su alcance. Además se encuentran pocos reportes que estudien la toxicología de esta planta y los encontrados lo hacen de forma oral y estudian el extracto fluido.8,11 Uno de los usos reportados como significativos en nuestro país es la decocción para el alivio de inflamaciones reumáticas tanto por ingestión oral como por aplicación tópica;12 por lo que nos propusimos como objetivo determinar la toxicidad aguda tópica y la irritabilidad dérmica primaria de la decocción al 50 % de hojas frescas de caisimón de anís.

 

MÉTODOS

Material Vegetal

Se emplearon hojas frescas de Piper auritum Kunth denominada comúnmente caisimón de anís, colectadas al momento de usarse en los terrenos aledaños al bioterio de nuestro laboratorio. Identificadas por la Dra. C. Lérida Acosta y con voucher ROIG 4519. Se realizó una decocción al 50 % en frasco de vidrio tapado dejando en ebullición 5 min, arrojando un valor de sólidos totales de 0,82 %.

Animales

Para la toxicidad aguda dérmica se emplearon ratas Wistar no isogénicas convencionales de aproximadamente 180 g de peso corporal enviadas por el Centro Nacional para la Producción de Animales de Laboratorio (CENPALAB) con su correspondiente certificado de salud. Mantenidas en cajas de poliuretano-T4 en el bioterio del Laboratorio Central de Farmacología, a temperatura de 23 oC, humedad relativa de 50-60 %, un período de luz-oscuridad de 12 h cada uno, con libre acceso a pienso para ratones y ratas ALYCO® CMO 1000 y al agua.

Para la irritabilidad dérmica primaria se emplearon conejos albinos Nueva Zelanda machos de aproximadamente 1,8-2,0 kg, procedentes del mismo centro. Mantenidos en muebles adecuados para la especie, con libre acceso a pienso de mantenimiento de conejos ALYCO® CMO 1400 y al agua.

Ambas especies animales tuvieron un período de adaptación a nuestras instalaciones de cinco días.

Los estudios se realizaron cumpliendo las guías de buenas prácticas13 para el cuidado y uso de animales de laboratorio.14

Ensayo de Toxicidad Aguda Dérmica (TAD)

El estudio se realizó según la propuesta a nueva guía 434 de la OECD (Organisation for Economic Co-operation and Development). Se emplearon 10 ratas Wistar (5 de cada sexo) para cada grupo, se afeitó el lomo de los animales 24 horas antes de comenzar el procedimiento cuidando no dañar la piel, en un área del lomo aproximada de 10 % de la superficie corporal. Se aplicaron 10 mL de la decocción al grupo tratado e igual cantidad de agua destilada al grupo control en el área rasurada, se cubrió la misma con un apósito de gasa y se fijó con esparadrapo. A las 24 horas se retiró la venda limpiando cualquier residuo de esta zona. Durante este tiempo se observaron síntomas y signos clínicos de toxicidad. Se registró el peso de los animales al inicio, a los 7 y 14 días posteriores al experimento. Pasado este tiempo los animales fueron sacrificados por inhalación letal de éter y se realizó estudio macroscópico de los órganos principales.15

Ensayo de irritabilidad dérmica primaria

Veinticuatro horas antes del ensayo los conejos albinos New Zeland machos de aproximadamente 2,0 Kg fueron pelados y afeitados tratando de no erosionar la piel del lomo. Se seleccionaron tres animales con la piel intacta, aplicaron 0,5 mL de la decocción en un área de aproximadamente 6 cm2 de la piel y se cubrió con un parche de gasa sostenido a la piel mediante un esparadrapo no irritante. Los animales fueron separados y mantenidos en cajas de retención, para evitar que estuvieran en contacto con el parche.

Al final del período de exposición 4 horas, se removió la sustancia remanente con agua destilada evitando el daño a la epidermis.16,17

Las lecturas de eritema y edema se hicieron a 1, 24, 48 y 72 horas posteriores a la remoción del parche, evaluándose según las escalas establecidas (tablas 1 y 2) y calculándose el índice de irritación primario (IIP)

El eritema se estableció por visualización y el edema por palpación ligera.

Análisis estadístico

Los datos del peso de los animales expresaron en madia ± desviación estándar y se procesaron por el programa estadístico GraphPad Prism 5. Las diferencias estadísticas entre los grupos se determinaron mediante Análisis de Varianza (ANOVA), seguido de un test de comparación múltiple de Dunn, con una significación de P < 0,05.

 

RESULTADOS

Ensayo de toxicidad aguda dérmica

La administración tópica a través de parches de la decocción al 50 % de partes aéreas frescas, no causó muerte, ni signos clínicos.

En las figuras 1 y 2 se muestran los resultados de incremento en peso para ambos grupos, no apreciándose diferencias significativas entre los animales tratados y los controles.

 

Al realizarse la autopsia no se observaron daños macroscópicos en los principales órganos (corazón, pulmones, hígado, bazo, riñones y cerebro).

Ensayo de irritabilidad dérmica primaria

En la evaluación de la irritabilidad dérmica del extracto acuoso al 50 % de hojas de caisimón de anís en los animales tratados no se aprecia ningún daño ni alteración perceptible, obteniéndose un IIP de 0.

 

DISCUSIÓN

La toxicidad aguda ya sea oral o por absorción dérmica de la sustancia de prueba, tiene por objeto determinar los efectos de una dosis única y muy elevada de una sustancia. Usualmente, el punto final del estudio es la muerte del animal aunque es muy importante la aparición de síntomas o manifestaciones que indiquen daño a la salud del animal de estudio, así como las variaciones de peso de los mismos.

La no aparición de alteraciones en los signos clínicos, con la administración de una sustancia para la evaluación de su efecto agudo, es un factor importante a tener en cuenta, porque las alteraciones del cuadro clínico pueden resultar una clara exposición de posibles alteraciones anatomofisiológicas producidas por la acción tóxica de una sustancia. Esto sería dependiente de varios factores como la duración de la exposición, el grado y la generalización de la lesión, los órganos diana afectados, la cantidad total de la sustancia en sangre, edad y salud general del animal.18

En nuestra investigación de toxicidad aguda e irritabilidad dérmica de la decocción al 50 % de hojas frescas del Piper auritum Kunth no hubo ninguna muerte, ni se apreciaron síntomas y signos de toxicidad, además el índice de irritabilidad fue 0. Lo que se corresponde con otros estudios toxicológicos de esta planta por otras vías de administración y con otros extractos que también han obtenido resultados de baja toxicidad.8,11,12

El peso de los animales en un estudio de toxicidad posee una importancia vital como posible indicador de daño provocado por la sustancia evaluada, por tal motivo, una variación significativa en este indicador sugiere un posible daño orgánico. En este estudio el incremento de peso fue el esperado para la especie, y similar tanto en el grupo tratado como en el control.

En nuestra investigación podemos concluir que la decocción al 50 % de Piper auritum Kunth posee un índice de irritabilidad y una toxicidad dérmica bajas en nuestras condiciones de ensayo.

 

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

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17. ISO 10993 Biological Evaluation of Medical Devices. Part. 10. Test for irritation and sensitisation. 2000:8-13.

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Recibido: 17 de octubre de 2014.
Aprobado: 12 de noviembre de 2014.

 

 

Lic. Marisol López Barreiro. Laboratorio Central de Farmacología. "Dr. C. Francisco J. Morón Rodríguez", Facultad de Cencias Médicas "Dr. Salvador Allende", Carvajal entre Agua Dulce y A, Cerro, La Habana, Cuba. CP 12000.

Teléfono: 870-1663. Correo electrónico: marisolb@infomed.sld.cu

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