ARTÍCULO ORIGINAL
Evaluación de la calidad, seguridad y capacidad antioxidante de Murraya paniculata L y su tintura
Evaluation of the quality, safety and antioxidant capacity of Murraya paniculata L and its tincture
MSc. Celia Magaly Casado Martí,I Dra. Yamilet Irene Gutiérrez Gaitén,I MSc. Noel Varona TorresII
I Departamento de Farmacia. Instituto
de Farmacia y Alimentos. Universidad de la Habana, Cuba.
II Laboratorios Novatec. La
Habana, Cuba.
RESUMEN
Introducción: Murraya paniculata
(L.) Jack (Rutaceae) es empleada tradicionalmente en nuestro país
para el alivio del dolor y la inflamación asociados a enfermedades osteomioarticulares,
pero no se reportan estudios que profundicen en elementos tan importantes
como lo constituyen su calidad y seguridad. En el presente trabajo se evalúa
su potencialidad para ser empleado como alternativa terapéutica.
Métodos: la droga vegetal
(hojas frescas de M. paniculata), y su derivado galénico (tintura),
fueron sometidas a un estudio farmacognóstico que incluyó la evaluación
macromorfológica de las hojas de la especie, así como la determinación
de sus índices numéricos de calidad y el tamizaje fitoquímico.
Asimismo la tintura obtenida fue sometida a la evaluación de sus requisitos
organolépticos, índices numéricos de calidad, análisis
capilar, tamizaje fitoquímico y cromatografía en capa delgada; desde
el punto de vista preclínico, fue evaluada su seguridad a través
de un estudio de toxicidad aguda dérmica y su capacidad antioxidante
mediante las técnicas FRAP y DPPH.
Resultados: los parámetros
de calidad establecidos fueron incluidos en la Guía de fitofármacos
y apifármacos. Los resultados preclínicos obtenidos en la evaluación
de la tintura fueron satisfactorios, ya que no generó efectos tóxicos,
el análisis cualitativo DPPH evidenció su capacidad antioxidante
y el análisis por FRAP mostró un poder antioxidante similar al de
la vitamina C.
Conclusiones: los resultados alcanzados
permiten garantizar que M. paniculata sea una alternativa segura y
eficaz para el uso en la terapéutica, como parte del arsenal de nuestro
sistema de salud en Medicina Natural y Tradicional.
Palabras clave: Murraya paniculata, evaluación farmacognóstica, actividad antioxidante.
ABSTRACT
Introduction: Murraya paniculata
(L.) Jack (Rutaceae) has been traditionally used in our country
to treat pain and inflammation caused by osteoarticular disorders. However,
there are no reports of studies about such important topics as its quality
and safety. The present paper evaluates the potential use of M. paniculata
as a therapeutic alternative.
Methods: a pharmacognostic study
was conducted of the plant drug (fresh leaves of M. paniculata) and
its galenic derivative (tincture) which included a macromorphological evaluation
of the leaves, determination of numerical indices of quality and phytochemical
screening. The tincture obtained was evaluated for organoleptic requirements
and numerical indices of quality, and underwent capillary analysis, phytochemical
screening and thin-layer chromatography. Preclinical safety was assessed in
an acute dermal toxicity study. Antioxidant capacity was examined by FRAP
and DPPH.
Results: the quality parameters
obtained were included in the Guide of Phytomedicines and Apimedicines. Preclinical
evaluation of the tincture was satisfactory, since no toxic effects were found.
Qualitative DPPH analysis revealed antioxidant capacity and FRAP found an
antioxidant power similar to that of vitamin C.
Conclusions: results confirm the
status of M. paniculata as a safe, effective therapeutic alternative
within the natural and traditional medicine stock of our country's health
system.
Key words: Murraya paniculata , pharmacognostic evaluation, antioxidant activity.
INTRODUCCIÓN
El uso y la comercialización de fitofármacos y productos naturales, con fines medicinales, muestran un crecimiento acelerado en los últimos años, lo cual se evidencia en el aumento significativo de la demanda mundial. Es preocupante que en muchos casos, no se cuenta con estándares mínimos de calidad necesarios, para garantizar su seguridad y eficacia, lo que representa un riesgo para la salud de sus consumidores.1
En este sentido y teniendo en cuenta que el resurgir del uso de los productos naturales en los países del tercer mundo, es fundamentalmente debido a una necesidad primaria en los sistemas de salud y en la estructura económica, de lo cual no queda exenta Cuba, es que se considera de suma importancia el estudio y la introducción en el arsenal fitoterapéutico de nuestra comunidad a M. paniculata, lo que redundaría en un beneficio social para nuestras áreas de salud.
M. paniculata , también conocida por los sinónimos de Chalcas paniculata L., M. exótica y por los nombres comunes de naranjo de jazmín, jazmín de Persia, mirto, murallera y café de la india, es reconocida tradicionalmente por sus propiedades astringentes, estimulantes, analgésicas, antiinflamatorias, entre otras.2-6
La evaluación farmacognóstica de la droga vegetal, así como, la determinación de los parámetros de calidad de su tintura, unido a la evaluación de su seguridad y capacidad antioxidante, constituyen los objetivos fundamentales del presente trabajo y contribuirán a la validación futura de dicha especie vegetal, como una alternativa terapéutica viable, a tener en cuenta dentro de nuestra Medicina Natural y Tradicional.
MÉTODOS
Recolección, selección y establecimiento de los parámetros
de calidad del material vegetal de M. paniculata
La especie vegetal, M. paniculata, fue recolectada en la Estación Experimental de Plantas Medicinales del municipio Alquizar, provincia Artemisa y registrada en el herbario del Jardín Botánico Nacional con el código de identificación HFC 85586 (HAJB). Para el desarrollo de la investigación se emplearon las hojas y tallos finos en estado fresco.
El establecimiento de los parámetros de calidad se llevó a cabo siguiendo las normativas de la OMS 7 y los procedimientos descritos por Miranda y Cuéllar.8 Se realizó la evaluación macromorfológica y fueron determinados el contenido de agua (método azeotrópico), las cenizas totales, sustancias extraíbles (utilizando etanol al 70 % como menstruo) y fue desarrollado el tamizaje fitoquímico.
Obtención de la tintura y determinación
de sus parámetros de calidad
A partir del material vegetal fresco, se elaboró una tintura al 20 % por el método de maceración, por un período de 7 días, empleando etanol al 70 % como menstruo, según lo reportado por la NRSP 3129 y Miranda y Cuéllar.8 Los procedimientos descritos en dichas fuentes, fueron seguidos también, para la determinación de sus parámetros de calidad, realizándose cinco réplicas para cada experimento, siendo evaluados los requisitos organolépticos (olor, color), así como, pH, densidad relativa (picnometría), sólidos totales, índice de refracción, asimismo, se desarrolló el análisis capilar, tamizaje fitoquímico y la cromatografía en placa delgada.
En el caso específico del análisis cromatográfico fue desarrollo de forma ascendente, utilizando como fases móviles las mezclas de disolventes siguientes: acetato de etilo: metanol: agua (100:13,5:10) y hexano: acetato de etilo (7:3). Para el revelado de las placas fueron empleadas las condiciones siguientes: luz UV a 254 y 365nm de longitudes de onda, exposición a los vapores de amoníaco, y rociado con sulfato cérico y calor.
Evaluación preclínica
Ensayo de toxicidad aguda dérmica de M. paniculata.
Se desarrolló la metodología descrita en la Guía de la OECD número 402 establecida en el año 1987.10 Para ello se emplearon ratas procedentes del CENPALAB (Centro Nacional para la Producción de Animales de Laboratorio), se confeccionó un grupo tratado compuesto por 5 animales, que recibieron el producto en estudio. El ensayo tuvo una duración de 19 días (5 de aclimatación y 14 de ensayo). Se aplicaron 4ml por 200mg de peso corporal de las ratas, por vía dérmica y se evaluaron en ellos, signos clínicos y conductuales, así como, la ganancia de peso, entre otros elementos.
Evaluación de la capacidad antioxidante
de M. paniculata
Para la caracterización cualitativa y cuantitativa de la capacidad antioxidante de la tintura de M. paniculata se desarrollaron dos ensayos, un análisis DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) cualitativo, en CCD (Cromatografía en Capa Delgada) y el ensayo para la determinación del Potencial de Reducción Total (FRAP: Ferric Reduction Antioxidant Power). En el primer caso se emplearon las condiciones cromatográficas siguientes: placas de 10 x 5cm de gel de sílice F254nm, el desarrollo cromatográfico fue ascendente y la fases móvil acetato de Etilo: metanol: agua (100:13.5:10), el revelado se realizó mediante rociado con disolución de DPPH (0,2 %) en metanol y el tiempo de espera fue de 60 minutos. En la evaluación cuantitativa por FRAP las determinaciones se realizaron mediante un lector de placas de 96 pocillos, marca SUMA (Sistema ultramicroanalítico) con filtro 590 nm.
RESULTADOS
Parámetros de calidad del material vegetal de M. paniculata
En el análisis macromorfológico de las hojas y tallos de M. paniculata, pudieron describirse un grupo importante de elementos. Las hojas en su condición fresca presentaron forma aovadas, de borde entero, base aguda-obtusa, palminervias, con textura membranosa, superficie glabra, color verde oscuro por el haz y más claro por el envés, con un olor aromático y valores de 3,64 ± 0,49 cm de largo por 1,86 ± 0,34 cm de ancho. Por su parte los tallos en su condición fresca presentaron una consistencia herbácea, forma cilíndrica, con una superficie externa verde lisa y una superficie interna color crema claro, fibrosa, con pequeñas estrías.
En la tabla 1 se exponen los valores obtenidos, en porcentaje, para los parámetros físico-químicos evaluados en el material vegetal.
Los resultados del tamizaje fitoquímico realizado evidenciaron la posible presencia en la droga vegetal de: compuestos grasos, lactonas, coumarinas, triterpenos; esteroides, saponinas, aminoácidos, sustancias reductoras; fenoles, taninos, flavonoides y la presencia dudosa de quinonas.
Parámetros de calidad de la tintura
de M. paniculata
Una vez obtenida la tintura, se le determinaron un conjunto de parámetros de calidad cuyos resultados se muestran en la tabla 2. Adicionalmente, la figura 1 muestra la imagen capilar resultante del análisis realizado a la tintura.
